METEOR系統介紹

METEOR是一款獲獎的熒光顯微鏡（FLM），可以直接集成到特定的冷凍聚焦離子束（FIB）/掃描電鏡（SEM）腔室中。METEOR支持原位冷凍光電聯用（cryo-CLEM），并能輕松適應您的工作流程。它不僅減少了顯微鏡之間的轉移步驟，保護脆弱的樣品免受不必要的污染，還允許您在銑削過程中和之后成像感興趣區域（ROI）。通過減少當前繁瑣的工作流程中的轉移步驟，METEOR可以大大降低冷凍關聯顯微技術工作流程的復雜性。您的樣品薄切片制備工作流程將簡化到7個制造步驟：加載樣品，然后捕獲熒光顯微圖像和掃描電鏡圖像，且無需進行樣品轉移，在系統將兩個圖像自動關聯后，直接移至目標區域，在完成薄切片研磨之后，用熒光顯微鏡確認感興趣區域是否完好。

對于冷凍電子斷層掃描（cryo-ET）工作流程，這使得驗證感興趣區域（ROI）是否包含在樣品中成為可能。不僅來自樣品的熒光標記（FLM）信號確認了目標蛋白質正在通過冷凍電子斷層掃描（cryo-ET）被解析，它還使寶貴的透射電鏡（TEM）機時能更好地用于有用的樣品。在“銑削和觀察”工作流程中，隨著更多材料被銑削，可在原位獲取熒光標記（FLM）數據，從而在整個生物材料體積中提高功能和結構數據的相關性。

冷凍cryo-ET和體積冷凍CLEM在細胞生物學、病毒學、微生物學、免疫學和藥物開發領域都能揭示新的見解。通過冷凍電鏡獲得的深刻見解有助于在接近天然的細胞環境中以亞納米分辨率揭示生物結構。不僅無需蛋白質純化，該技術還允許觀察蛋白質-蛋白質和蛋白質-藥物相互作用。因此，冷凍電鏡有可能提供更有效和針對性的藥物設計流程，并加速藥物開發進程。借助體積CLEM，可獲取整個細胞的功能和結構信息，提供更全面的視角。細胞器形態的變化及其分布可輕松追溯到蛋白質表達的水平和位置。

很不幸，通過冷凍cryo-ET和體積cryo-CLEM獲取有用見解的速度受到了其復雜流程的阻礙。當前工作流程包括先用獨立的冷凍熒光顯微鏡cryo-FLM對樣品進行成像，再將其轉移到cryo-FIB設備中，這一過程可能會非常繁瑣和令人沮喪。樣品轉移過程中可能造成的樣品損壞和污染，以及在材料被銑削去除時難以檢查樣品，這些都對成功獲取良好數據造成了嚴重影響。這些挑戰以及冷凍cryo-ET和體積冷凍關聯顯微鏡CLEM的巨大潛力，激勵我們開發解決方案，以簡化流程并讓研究者充分發揮潛力。

使用METEOR引導薄片制備時，用戶先將樣品裝載至配備METEOR的cryo-FIB中。隨后將電鏡載物臺移至METEOR位置，獲取全景圖像和高精度Z軸堆棧，從而定位目標區域(ROI)。接著移動載物臺至SEM位置采集同一ROI的SEM圖像。通過圖像關聯分析，用戶可確定薄片制備位置并啟動銑削。在銑削過程中及完成后，均可根據熒光信號驗證薄片中的ROI存在性，之后再將樣品轉移至冷凍透射電鏡(cryo-TEM)。薄片的熒光顯微鏡(FLM)信號不僅能確認目標蛋白質正被冷凍電子斷層掃描(cryo-ET)解析，還可確保寶貴的透射電鏡(TEM)機時僅用于有用的樣品。

在三維冷凍光電聯用成像中，樣品先通過METEOR進行成像以確定目標區域(ROI)。隨后使用掃描電鏡(SEM)獲取ROI的高對比度圖像，接著用聚焦離子束(FIB)刻蝕樣品表層，之后再次使用SEM對剛暴露的表面進行成像。這種"銑削-觀察"工作流程將在整個樣品體積內重復進行。借助METEOR，隨著更多材料被銑削去除，可以持續監測ROI的熒光信號，從而在整個生物材料體積內實現功能與結構數據的關聯性優化。

METEOR系統由3個主要部分組成：電子機架（放置在顯微鏡房間內）、主體（安裝在FIB/SEM聚焦離子束雙束電鏡的一個端口上）和電鏡腔室內光學器件（安裝在FIB/SEM腔室內）。METEOR系統配有一臺控制PC及一套ODEMIS采集軟件，用于系統控制及熒光圖像的采集。

Delmic冷凍解決方案還包括：

CERES Clean Station 清潔的制備工作站: 在定制的高效清潔站中制備低溫EM樣品，以完全防止冰污染；每一步都在無水手套箱（濕度<1%/1ppm水）中輕松制備低溫EM樣品。

CERES Ice Shield 冰盾：在冷凍薄片制備過程中提供終極保護，防止冰污染；采用專有技術，在薄片研磨過程中保護您的低溫樣品免受寄生冰的生長；使冷凍FIB制備更多無冰污染的薄片，以獲得高質量的斷層圖像和高通量。

CERES Vitri-Lock 高真空低溫傳輸模塊：可實現安全無冰污染的低溫樣品轉移；在CERES制備工作站和CryoFIB之間在高真空下傳輸低溫樣品，以盡量減少轉移過程中水分的存在；采用主動冷卻方式，樣品可以保持玻璃化狀態長達30分鐘。

METEOR 2.0 系統介紹

METEOR 2.0是新一代冷凍熒光顯微鏡系統，專為無縫集成至冷凍聚焦離子束 (cryo-FIB) 而設計。該系統可在高真空腔體內直接進行熒光成像，省去不必要的樣品轉移步驟，從而降低冰污染、樣品失玻璃化以及其他損傷的風險。METEOR 2.0為用戶提供簡化且可靠的工作流程，滿足不斷發展的冷凍電子斷層掃描 (cryo-ET) 研究需求，確保薄片制備過程高效、精準且無污染。